羊布病检测的2个方法,布病人畜共患,一定要学会!

发表于 讨论求助 2020-10-19 06:28:48

羊布氏杆菌病是羊的一种慢性传染病。主要侵害生殖系统。羊感染后,以母羊发生流产和公羊发生睾丸炎为特征。


       布氏杆菌病也是一种人畜共患的慢性传染病。其特点也是生殖器官和胎盘发炎,引起流产、不育和各种组织的局部病症。

1

布病病原

      病原为布氏扦菌。它存在于病畜的生殖器官、内脏和血液。该菌对外界的抵抗力很强,在干燥的土壤中可存活37天,在冷暗处和胎儿体内可存活6个月。1%来苏尔,2%的福尔马林,5%的生石灰水15分钟可杀死病菌。


布氏杆菌病的检测方法有:试纸卡检测、虎红平板凝集试验、试管凝集试验(莱特试验)、半胱氨基酸试管凝集试验、抗人球蛋白试验,生产中常用的方法为试纸卡检测、虎红平板凝集试验,详细介绍如下:


一、布病试纸检测


01

原理

布氏杆菌抗体快速检测试纸基于胶体金免疫层析技术。检测时,样品中的布氏杆菌抗体与胶体金包被的抗原结合形成抗原抗体复合物,并沿着试纸流向NC膜的另一端。当该复合物流到膜上的T区时,固定在膜上的特异性抗原捕获该复合物并逐渐凝集成一条可见的T线。C线出现则表明免疫层析发生,即试纸有效;T线出现则表明样品中含有布氏杆菌抗体。


02

 保存和稳定性


试纸卡于室温(<30℃)阴凉干燥处保存,不可冷冻,避免阳光直晒,自生产日期起18个月内有效。


03

测试步骤


1.采血1 ml,1500转/分钟,离心。(样品若不能立即测试,应冷藏保存,超过24小时,应冷冻保存。)

2. 将未开封的试纸卡和检测样品恢复至室温。

3.用吸管吸取血清,向平坦放置的试纸卡加样孔中缓慢滴入1滴。

4.取出试纸卡包装中的稀释液,用吸管吸取,向试纸卡的加样孔缓慢滴入2滴。

5.5分钟判断结果,10分钟后的结果无效。


04

结果判断


阳性:C线显示红色色带,T线也显示红色色带,无论颜色深浅均判为阳性。

阴性:C线显示红色色带,T线不显示红色色带,判为阴性。

无效:C线不显示红色色带,无论T线是否显示红色色带,该试纸均判为无效。

05

注意事项

1.如果购买时发现过期,破损,污染的产品,请在购买处进行更换。

2.所有试纸启封后1小时内使用。

3.本品为一次性产品,请勿重复使用。

4.请勿使用非本品随附的稀释液。

5.请勿使用自来水、纯化水及蒸馏水作为阴性对照。

6.如滴加检测液后30秒内,在测试窗口无液体移行,则再补加1滴检测液。

7.检测样品可能具有潜在感染性,样品和使用过的试剂应作为微生物危险品处理。

8.试纸为兽医体外快速诊断工具,仅提供定性检测结果,应综合临床症状或其它常规检测方法进行确诊。

二、虎红平板凝集实验
1、原理

如果牲畜感染布病,机体自身的免疫系统会产生抗体,我们通过采集已感染动物的血清制作成的抗原,和等量的待检动物血清相混合,如果待检动物血清中含有抗体,那么就会和抗原相结合形成沉淀物,我们称为阳性,如果没有沉淀出现,我们称为阴性。阳性说明被检测动物感染布病,阴性说明没有感染。


2、实验设备 

1、离心机

2、微量移液器,黄色吸头

3、抗原。哈药等生产,有些地方畜牧局可以提供。

4、5ml离心管,5ml采血注射器,需贴标签,标签跟羊的耳标一致。

5、玻璃板画格或专业滴定板。玻璃板画格标签、离心管标签、羊耳标三者一致。

6、牙签,医用手套,记录本,标记笔。



右上为离心机,左为抗原


3、操作步骤

1、采血,静脉采血3ml。缓慢注入离心管。做好标记,血清号和羊号一致。 

2、离心。4000R|min 离心7分钟。

3、用微量移液器取0.03ml待检血清放置于滴定板或玻璃板上

4、取0.03ml抗原和血清相混合。

每只羊单独一个吸头,用牙签搅拌均匀,等待4分钟左右看结果。

布病检测

试验


玻璃板画格

试验


4、结果观测

1、若无凝集为阴性,记为“—”。 

2、如果出现少量凝集反应为阳性,

一般再去采血复检。记为“+”。

3、如果出现50%凝集,记为“++”。

4、如果大部分凝集,记为“+++”。

5、如果全部凝集。记为“++++”。

本实验检测结果不是百分之百准确,

进一步确诊需要细菌学和生化实验。


结果对比

三、防控措施

目前,本病尚无特效的药物治疗,只有加强预防检疫。

1、 定期检疫。羔羊每年断乳后进行一次布氏杆菌病检疫。成羊两年检疫一次或每年预防接种而不检疫。对检出的阳性羊要捕杀处理,不能留养或给予治疗。


2、免疫接种。当年新生羔羊通过检疫呈阴性的,用“猪2号弱毒活菌苗”饮服或注射。羊不分大小每只饮服500亿活菌。疫苗注射,每只羊25亿菌,肌肉注射。


3、羊群受感染后无治疗价值,发病后羊群防治措施是用试管凝集反应或平板凝集反应进行羊群检疫。


发现呈阳性和可疑反应的羊均应及时隔离,以淘汰屠宰为宜,严禁与假定健康羊接触。必须对污染的用具和场所进行彻底消毒;流产胎儿、胎衣、羊水和产道分泌物应深埋。凝集反应阴性羊用布氏杆菌猪型2号弱毒菌或羊型5号弱毒苗进行免疫接种。


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